巴佛洛霉素A1 Bafilomycin A1
产品编号:AT0511
质量标准:>99.0%
包装规格:25ug 100ug
产品形式:黄色结晶粉末
基本信息
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分子式
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C35H58O9
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分子量
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622.83
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CAS No.
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88899-55-2
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储存条件
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-20℃,避光防潮密闭干燥
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溶解性
(25°C)
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DMSO 6 mg/mL (9.63 mM)
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Water Insoluble
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Ethanol Insoluble
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注意事项
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溶解性是在室温下测定的,如果温度过低,可能会影响其溶解性。
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其他说明
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为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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简介: Bafilomycin A1 是从链霉菌属物种分离的大环内酯抗生素,是液泡 V-ATP 酶的抑制剂。
别名:(-)-Bafilomycin A1;巴佛洛霉素 A1
化学性质
外观:… 黄色结晶粉末
溶解性:…………………DMSO 6 mg/mL (9.63 mM);Water Insoluble;Ethanol Insoluble
纯度:… >99.0%
IC50:… ATP 酶:IC50 = 30 nM (原鸡); 液泡型 ATP 合酶亚基 S1: IC50 = 100 nM (人)
储存条件:-20℃,避光防潮密闭干燥
用途及描述 :巴佛洛霉素 A1 来源于灰色链霉菌(Streptomyces griseus),是动物细胞、植物细胞和微生物液泡型 H+-ATP 酶(V-ATP
酶)的一种特异性抑制剂。
储液配置:
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体 DMSO 质 量浓度 积
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1 mg
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5 mg
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10 mg
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1 mM
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1.6056 mL
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8.0279 mL
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16.0557 mL
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5 mM
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0.3211 mL
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1.6056 mL
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3.2111 mL
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10 mM
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0.1606 mL
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0.8028 mL
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1.6056 mL
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50 mM
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经典实验操作(来源于公开文献,仅供参考)
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激酶实验
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ATPase 酶活性试验:
ATPase 酶测定培养基包含 6 mM MgSO4 ,50 mM HEPES (pH 7.4),200 mM
Na2 SO3 (V-ATPase 活化剂),0.5 mM 原钒酸钠(P-ATPase 抑制剂),0.5 mM 叠氮化钠(F-ATPase 抑制剂)和 3 mM Na2 ATP。该培养基(1.0 mL)加入或不加入 V 型 ATPase 抑制剂bafilomycin A1,与过滤的匀浆(0.1 mL)在23–25 °C 下培养60 分钟。通过加入1 mL 3%TCA停止反应。广谱测定的空白对照根据酶测定制备,除了组织样本是在酸之后加入。磷酸盐的分析通过加入 2 mL 正丁醇和 0.2 mL 钼酸盐溶液(5 g 钼酸铵,22 mL H2 SO4 到 100 mL) 完成。涡旋 15 秒后,溶液用 0.5 mL 柠檬酸盐溶液(100 g/500 mL,pH 7.0)中和,再涡旋15 秒。然后将溶液离心(2000×g;3 分钟)以分离出丁醇相,其吸光度在 400 nm 下读出。制备标准正磷酸盐(0.1 μM–2.0 μM),并以酶活性检测相同的方式处理。酶活性表示为每小时和每毫克蛋白质释放的正磷酸盐的微摩尔量。V-ATPase 活性被认为是 Na2 SO3 ,原钒酸钠和叠氮化钠存在下测得的 V-ATPase 活性,与这些试剂和特定 V-ATPases 抑制剂 Bafilomycin A1 存在下测得的ATPase 活性之间的差异。
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细胞实验
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Cell lines: HeLa 细胞Concentrations: ~20 nM Incubation Time: 20 小时
Method:
幽门螺旋杆菌加入 HeLa 细胞之前,用抑制剂处理,如下:10 mM DCCD 在 30℃下处理 1 小时;100 μM NBD-CI 在 30℃下处理 1 小时,反应用 10 mM 终浓度的甘氨酸阻断;275 μM NEM 在 30℃下处理 1 小时,通过加入 275 mM β-巯基乙醇阻断反应;14 μM Mg-ATP 在0℃下处理 1 小时;100 μM KNO3 和 14 μM Mg-ATP 在 30℃下处理 1 小时;100 μM NaCO3 ,pH 11 在 0℃下处理 1 小时。然后将细菌提取物加入细胞,稀释 40 倍,终浓度为
0.65 mg/mL。对照组为 HeLa 细胞和未处理的细菌提取物,以及细菌提取物处理时相同环境下抑制剂 Bafilomycin A1 处理的细胞,稀释 40 倍后在相同的浓度下进行培养。分析细菌提取物的空泡活性。
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动物实验
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Animal Models: 年幼的(大约 9 天大)莫三鼻口孵鱼,莫桑比克罗非鱼
Formulation: 包含 0.05 % 二甲基亚砜(DMSO)的鱼缸水
Dosages: 10 μM
Administration: --
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【注意】
● 我司产品为非无菌包装,若用于细胞培养,请提前做预处理,除去热原细菌,否则会导致染菌。
● 部分产品我司仅能提供部分信息,我司不保证所提供信息的权威性,以上数据仅供参考交流研究之用。